Fungi associated with Paspalum guenoarum seeds: their impact on physiology and control / Fungos associados com sementes de Paspalum guenoarum: seus impactos na fisiologia e controle

ABSTRACT: Of the natural pastures grown in southern Brazil, those of the genus Paspalum are the most important. One of the factors that hinder their cultivation is the availability of quality seeds, that are often compromised by the presence of fungi. This study determined the in vitro sensitivity of Paspalum guenoarum ecotype azulão seed-associated fungus to certain fungicides and to measure the efficiency of chemical treatments for fungal control and seed physiological performance. Bipolaris micropus, Epicoccum sorghinum, Curvularia geniculata and Fusarium incarnatum associated with seeds were tested in vitro against Carbendazim; Tiram, Fludioxonil; Metalaxil-M, Carboxina; Tiram and Tiofanato-metílico at 0, 1, 2.5, 5, 10 and 30 µg/mL. This experiment was conducted in a completely randomized design (factorial 4 × 4 × 6). Qualitative variables were compared using the Tukey test (P ≤ 0.05) and quantitative variables were subjected to regression analysis. Carbendazim; Tiram and Fludioxonil; Metalaxil-M had the best fungicidal performances, each inhibiting three of the four fungi with LD50s below 1 µg/mL. Subsequently, these two fungicides were used alone or in combination in the in vivo test. A completely randomized design was used and the means were compared using the Tukey test (P < 0.05). The chemical treatment of the seeds resulted in improvement of five of the six evaluated physiological parameters. The identification of the primary fungi associated with Paspalum seeds reported in this research, as well as damage done to them, can be diminished using appropriate measures such as seed treatments.

RESUMO: Das pastagens naturais cultivadas no sul do Brasil, as do gênero Paspalum são as mais importantes. Um dos fatores que dificultam o cultivo é a disponibilidade de sementes de qualidade, muitas vezes comprometidas pela presença de fungos. Os objetivos deste estudo foram determinar a sensibilidade in vitro de fungos associados a sementes de Paspalum guenoarum ecótipo azulão a determinados fungicidas, medir a eficiência de tratamentos químicos para controle desses fungos e o desempenho fisiológico das sementes. Os fungos associados às sementes, Bipolaris micropus, Epicoccum sorghinum, Curvularia geniculata e Fusarium incarnatum foram testados in vitro contra Carbendazim; Tiram, Fludioxonil; Metalaxil-M, Carboxina; Tiram e Tiofanato-metílico em 0, 1, 2,5, 5, 10 e 30 µg/mL. Este experimento foi conduzido em um delineamento inteiramente casualizado (fatorial 4 × 4 × 6). As variáveis ​​qualitativas foram comparadas pelo teste de Tukey (P ≤ 0,05) e as variáveis ​​quantitativas foram submetidas à análise de regressão. Carbendazim; Tiram e Fludioxonil; Metalaxil-M tiveram os melhores desempenhos fungicidas, cada um inibindo três dos quatro fungos com LD50 abaixo de 1 µg/mL. Posteriormente, esses dois fungicidas foram utilizados isoladamente ou em combinação no teste in vivo. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado e as médias comparadas pelo teste de Tukey (P < 0,05). O tratamento químico das sementes resultou na melhoria de cinco dos seis parâmetros fisiológicos avaliados. A identificação dos fungos primários associados às sementes de Paspalum relatadas neste trabalho, bem como os danos causados ​​por eles, podem ser diminuídos usando medidas apropriadas, como tratamento de sementes.

Chemical composition and antifungal activity of propolis on Aspergillus flavus / Composição química e atividade antifúngica de própolis sobre Aspergillus flavus

Research has indicated the antifungal activity of ethanol extracts from propolis (EEP) on fungi of the genera Phakopsora, Colletotrichum, and Cercospora. Here, chemical compositions and antioxidant activity of three EEP (propolis from Scaptotrigona polysticta stingless bee and two types produced by Apis mellifera - red and brown) were evaluated and their action against Aspergillus flavus was investigated. Ash, dry extract, total phenolic and total flavonoid contents were determined. Phenolic composition was evaluated by high performance liquid chromatography, with using the following reference substances: gallic acid, caffeic acid, -coumaric acid, ferulic acid, quercetin, kaempferol, and apigenin. Tests on mycelial growth, sporulation, and germination of spores were performed to assess the biological activity of the EEP on A. flavus. All EEP showed low dry extract content (<11%) with adequate amounts of ash (<5%). The red EEP (Apis mellifera) showed the highest contents of total phenolic and total flavonoid (5.38 and 2.77 g 100 g-1), while the highest recorded antioxidant activity was exhibited by brown EEP (92.9%). The EEP of S. polysticta presented higher levels of -coumaric acid (10.99 mg g-1), while red and brown extracts from A. mellifera stood out with the highest levels of quercetin (27.26 mg g-1) and gallic acid (5.88 mg g-1), respectively. No extract was effective in inhibiting mycelial growth and sporulation of A. flavus, but red EEP inhibited spore germination. On the basis of these results, it is suggested that the inhibitory effect of red EEP on spore germination may be associated with increased levels of flavonoids found in it as compared with the other extracts investigated here.

Outros estudos apontaram a ação antifúngica dos extratos etanólicos de própolis (EEP) sobre fungos do gênero Phakopsora, Colletotrichum e Cercospora. Neste estudo, avaliou-se a composição química e a atividade antioxidante de três EEP (própolis produzido pela abelha sem ferrão Scaptotrigona polysticta e dois tipos de própolis produzida pela Apis melífera: marrom e vermelha) e sua ação contra o Aspergillus flavus. Foram determinados os teores de cinzas, extrato seco, fenólicos e flavonoides totais nos EEP. A composição fenólica foi determinada por cromatografia líquida de alta eficiência, empregando-se as seguintes substâncias de referência: ácido gálico, ácido p-cumárico, ácido ferrúlico, quercitina, kaempferol e apigenina. Para avaliar a atividade biológica dos EEP sobre A. flavus foram realizados os testes de crescimento micelial, esporulação e germinação de esporos. Todos os EEP apresentaram baixos teores de extrato seco (< 11%), porém quantidades de cinzas adequadas (< 5%). O EEP vermelha apresentou os maiores teores de fenólicos e flavonoides totais (5,38 e 2,77 g 100g-1), enquanto que a maior atividade antioxidante registrada foi do EEP marrom (92,9%). O EEP de S. polysticta apresentou maiores teores de ácido p-cumárico (10,99 mg g-1), enquanto que os de A. mellifera, vermelha e marrom, destacaram-se com os maiores níveis de quercetina (27,26 mg g-1) e de ácido gálico (5,88 mg g-1), respectivamente. Nenhum extrato foi eficaz na inibição do crescimento micelial e esporulação de A. flavus, porém observou-se inibição na germinação de esporos pelo EEP vermelha. Sugere-se que o efeito inibitório na germinação de esporos pode estar relacionado com os maiores níveis de flavonoides encontrados na própolis vermelha, quando comparado com os outros extratos investigados.

Sensibilidade de Stenocarpella macrospora a fungicidas / Sensibility of Stenocarpella macrospora to fungicide

A aplicação de fungicidas nos órgãos aéreos é estratégia de controle para mancha-de-macrospora causada pelo fungo Stenocarpella macrospora. O objetivo do trabalho foi determinar a sensibilidade de S. macrospora a fungicidas pela inibição do crescimento do micélio (CM) e germinação de conídios (GC). Foram avaliados 12 fungicidas pertencentes aos grupos químicos dos benzimidazóis, estrobilurinas e triazóis, seis concentrações e dois isolados do fungo (SC e MT). Os fungicidas foram diluídos em água destilada e esterilizada e adicionados ao meio de cultura de batata-dextrose-ágar (micélio) e ágar-água (conídios) após a esterilização. A porcentagem de inibição do CM e GC foi calculada em relação à testemunha, estimando-se valores de concentração inibitória de 50% (CI50). Constatou-se que os fungicidas testados foram altamente fungitóxicos na inibição do CM, sendo que a CI50 foi menor que 1 ppm para todos os fungicidas, não havendo diferença entre isolados. Na inibição da GC, as estrobilurinas apresentaram maior fungitoxicidade, pois a CI50 ficou entre 0,0035 e 0,03 ppm, sendo o isolado SC mais sensível aos fungicidas. Os valores de CI50 para os diferentes fungicidas específicos para S. macrospora são úteis no monitoramento da sensibilidade do fungo em regiões com demanda intensa de fungicidas no milho.

The application of fungicides in the aerial organs is control strategy to macrospora spot caused by fungus Stenocarpella macrospora. The objective of this study was to determine the sensitivity of S. macrospora to fungicides by inhibition of mycelial growth (MG) and conidial germination (CG). It was evaluated 12 fungicides belonging to the chemical groups of the benzimidazoles, triazoles and strobilurins, six concentrations and two isolates of the fungus (SC and MT). The fungicides were diluted in sterile distilled water and added to the culture medium of potato dextrose agar (mycelium) and water-agar (spore) after sterilization. The percentage of inhibition of MC and CG was calculed in comparison with control, estimating of 50% inhibitory concentration (IC50). The fungicides tested were effective in inhibiting the MC. The IC50 was less than 1 ppm for all fungicides. There was no difference between isolates. The inhibition of CG had higher fungitoxicity strobilurins, and the IC50 was between 0.0035 and 0.03 ppm, and the isolated SC showed the higher sensitivity to the fungicides. The IC50 values obtained for fungicides and specific S.

Compatibility of Beauveria bassiana with acaricides / Compatibilidade de Beauveria bassiana com acaricidas

Visando avaliar a compatibilidade in vitro, entre o fungo entomopatogênico Beauveria bassiana (Bals.) Vuil. e acaricidas, 12 formulações com os ingredientes ativos clorfenapir, fenpiroximate, amitraz, acrinatrim, hexitiazox, abamectina, piridine, dimetoato, piridaphetion, óxido de fenbutatim, azociclotim e cihexatim, foram testadas em três concentrações (concentração Média - CM, metade daCM e duas vezes a CM). Para os parâmetros germinação de conídios, crescimento vegetativo e esporulação, apresentaram diferenças significativas na compatibilidade entre o fungo e as formulações utilizadas. As formulações mais compatíveis com o fungo, para os parâmetros avaliados, foram as pertencentes ao grupo químico da avermectina e piretróide. As formulações pertencentes ao grupoquímico do organofosforado e organostânico afetaram drasticamente a germinação de conídios, bem como o crescimento vegetativo e a esporulação.

The in vitro compatibility of the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana (Bals.) Vuil. with 12 acaricide formulations was evaluated. The active ingredients Clorfenapyr, Fenpyroximate,Amitraz, Acrinathrin, Hexythiazox, Abamectin, Pyridine, Dimethoate, Pyridaphethion, Fenbutatin Oxide, Azocyclotin and Cyhexatin were tested in three different concentrations (mean concentration - MC, half MC and twice the MC). The formulations tested affected conidial germination, vegetative growth and sporulation of the fungus in different levels. The formulations more compatible with B. bassiana were Avermectin and the pyrethroids. The acaricides belonging to the organophosphate and organostanic chemical groups, however, drastically affected conidial germination as well as vegetative growth and sporulation.